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时间:2013-11-13 14:24  lai源:www.schkyq.com  作者:纸箱kangyaqiangdu测试  点击:
GB/T4789.11-2003溶血衴ue辞蚓靬an(免费下zai)/纸箱kangyaqiangdu测试仪
qian言
本标准对GB/T 4789. 11-1994《食pin卫sheng微sheng物学检yan溶血衴ue辞蚓靬an》进xingxiu订。
本标准与GB/T 4789. 11-1994xiang比主要xiu改如下:
——按照GB/T 1.1-2000对标准文眏ing母袷胶臀淖纸鴛ingxiu改。
——xiu改并规范原标准中的“设bei和材料”。  
本标准zi实施之日起,GB/T 4789. 11-1994同时废止。
本标准you中华ren民共和国卫sheng部提出并归口。
本标准起caodanwei:北jing市卫shengfang疫站、中国疾病预fangkong制謝ing挠胧硃in安全suo。
本标准主要起caoren:剂以贤、ran陆、付萍、姚景hui。
本标准于1984年首次发bu,1994年第一次xiu订,本次为第二次xiu订。
1  穌uan?br /> 本标准规定了食苀en腥苎yue辞蚓募靬an方法。
本标准shi用于各类食pin和食物中毒yang苀en腥苎yue辞蚓募靬an。
2纸箱kangyaqiangdu测试仪规范xingyin用文件
    下列文件中的条款通guo本标准的yin用ercheng为本标准的条款。fanshi注日qi的yin用文件,其随后suo有的xiu改dan(bu包括勘误的na容)huoxiu订版均bushi用于本标准,然er,鼓励根据本标准达cheng协议的各方研jiushi否可使用这些文件的最xin版本。fanshibu注日qi的yin用文件,其最xin版本shi用于本标准。
GB/T 4789. 282003  食pin卫sheng微sheng物学检yan染色法、培养基和试剂
3设bei和材料
3.1  冰箱:O℃—4℃。
3.2恒wen培养箱:36℃士1℃。
3.3恒wen水yu锅:36℃tu1℃。
3.4  显微jing:10×~IOO×。
3.5均质器huo灭菌乳钵。
3.6离心机:4 000 r/min。
3.7架盘药物天平:O g~500g,精确zhi0.5g。
3.8灭菌试guan;10 mm×100 mm、16 mm×160 mm。
3.9  灭菌吸guan:1 rnL(具0.01 mL刻du)、5 mL、lO mL(具0.1 mL刻du)。
3. 10灭菌zhui形瓶:100 mL。
3. 11  灭菌培养皿:直jing90 mm。
3. 12灭菌棉签、nie子等。
4培养基和试剂
4.1  葡萄糖肉浸ye肉汤:按GB/T 4789. 28-2003中4.1规定。在肉浸ye肉汤na加入1%葡萄糖。
4.2  肉浸ye肉汤:按GB/T 4789. 28-2003中4.1规定。
4.3  匹克氏肉汤ua碐B/T 4789. 28-2003中4.62规定。
4.4  血qiong脂平板:按GB/T 4789. 28-2003中4.6规定。
4.5  ren血jiang。
4.6  0.25%lv化钙。
4.7  0. 85%灭菌sheng理盐水。
4.8  杆菌tai药敏纸片(含0. 04danwei)。
5检yan程序
检yan程序jian图1。
6操作步骤
6.1  yangpin处理
按wu菌操作称取食pin检yang25 g(mL),加入225 mL灭菌sheng理盐水,研cheng匀jiang制cheng混悬ye。
6.2培养
jiang上述混悬ye吸取5ml,,接种于50ml_葡萄糖肉浸ye肉汤,huo直接划线接种于血平板。如检yang污染严重,可同时按上述量接种匹克氏肉汤,jing36℃士l℃培养24 h,接种血平板,zhi36℃±1℃培养24 h,挑起乙型溶血圆形突起的xi小菌落,在血平板上fen纯,然后观cha溶血情况及革兰氏染色,并进xing链激酶试yan及杆菌tai敏感试yan。
6.3  形态与染色
本菌硈hi蛐wei騦uan圆形,直jing0.5μm~lμm,链状排列,链长短bu一,短者4ge~8gexi胞zucheng,长者20ge~30ge,链的长短常与xi菌的种类及sheng长环jing有关;ye体培养中易呈长链;在固体培养基中常li短链,bu形cheng芽孢,wu鞭毛,bu能运dong。
6.4培养特xing
该菌营养要qiu絰i撸谄胀ㄅ嘌蟬heng长bu良,在加有血ye、血qing培养基中sheng长较好。溶血衴ue辞蚓谘猶ing肉汤中sheng长时guan底呈絮状huo颗粒状chen淀。血平板上菌落为灰白色,半透明huobu透明,表面光滑,有乳光,直jing约0.5 mrn~0. 75 mm,为圆形突起的xi小菌落,乙型溶血链球菌周围有2 mm~4 mm界限fen明、wu色透明的溶血圈。
6.5链激hai试yan
    致病xing乙型溶血衴ue辞蚓懿鷖heng链激酶(即溶纤weidan白酶),此酶能激活正常ren体血ye中的血jiangdan
白酶原,使cheng血jiangdan白酶,er后溶解纤weidan白。
吸取cao酸钾血jiango.2 ml,,加0.8 ml.灭菌sheng理盐水,混匀,再加入18h~24h、36℃tu1℃培养的链球菌培养物0.5 mL及0.25%lv化钙0.25 ml.(如lv化钙已潮解,可shi当加大zhi0.3%~0.35%),振荡yao匀,zhi于36℃±1℃水yu中I0 min,血jiang混合物zixing凝固(凝固程duzhi试guan倒zhi,na容物bu流dong),然后观cha凝固块重xin完全溶解的时间,完全溶解为阳xing,如24h后bu溶解即为阴衴uⅫbr />     cao酸钾ren血jiang配制:cao酸钾0.01g放ren灭菌小试guan中,再加入5mLren血,混匀,jing离心chen淀,吸取上qingye即为cao酸钾ren血jiang。
6.6杆菌tai敏感试yan
    挑取乙型溶血衴ue辞蚓鷜e,涂bu于血平板上,用灭菌nie子夹取每片含有0. 04danwei的杆菌tai纸片,放于上述平板上,于36℃士1℃培养18h~24h,如有抑菌带出现即为阳xing,同时用已zhi阳xing菌株作为对照。
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